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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠羊膜胚胎細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠羊膜胚胎細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：肌球蛋白輕鏈7抗體 鋅指蛋白827抗體 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體 小鼠真皮成纖維細(xì)胞 大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞 QGP-1細(xì)胞 SCC-9人舌鱗癌細(xì)胞
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：558
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠羊膜胚胎細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7678 |
細(xì)胞簡介：
小鼠胚胎羊膜分離自羊膜組織；羊膜為單層上皮細(xì)胞互相連接構(gòu)成的薄膜。單層上皮細(xì)胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發(fā)育，羊膜與絨毛密切緊貼，形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜，無血管，富有韌性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）。羊膜腔內(nèi)充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面，并不深入胎盤組織中，隨著妊娠的進展羊膜腔逐漸擴大，占據(jù)整個子宮腔，羊膜是胎膜最內(nèi)一層，是一層半透明的薄膜，與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內(nèi)層，與人眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性，厚0.02~0.5mm，在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為i、iii、iv、v、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份，正是這些成份使羊膜可以充當(dāng)“移植的基底膜"而發(fā)揮一種新的健康合適的基質(zhì)。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠羊膜胚胎采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠羊膜胚胎經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠合成酶試劑盒 小鼠合成酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠合成酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠合成酶試劑盒、小鼠合成酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠胰淀素試劑盒 小鼠胰淀素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠胰淀素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠胰淀素試劑盒、小鼠胰淀素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠抑制素試劑盒 小鼠抑制素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠抑制素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抑制素試劑盒、小鼠抑制素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒 小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、小鼠增殖細(xì)胞核抗原eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human rheumatoid factor (RF) ELISA Kit 人類風(fēng)濕因子(RF)試劑盒
Humancholyglycine,CGELISAKit 人甘膽酸(CG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
associatedproteinA,SP-A試劑盒大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T
游離脂肪酸化學(xué)比色法定量試劑盒50次
MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
ECHDC1蛋白抗體
凋亡相關(guān)蛋白5抗體
COLEC10重組小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
FASLG重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
ACVR1 Protein Canine 重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
COLEC10重組小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ACVR1 Protein Canine 重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FASLG重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein
小鼠羊膜胚胎細(xì)胞大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)試劑盒 ，英文名： Big ET ELISA Kit
Porcine adiponectin (ADP) ELISA Kit 豬脂聯(lián)素(ADP)試劑盒
ELISA 小鼠白蛋白(mouse Albumin) 進口分裝
CLIAKitforLN(HumanLaminin)ELISAKIT人層連蛋白/板層素
通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒10次
ELISAKitβ-lactamase雞β內(nèi)酰胺酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行
