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更新時間:2024-11-04
小鼠嗅鞘細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
嗅球組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7365 |
細胞簡介:
小鼠嗅鞘分離自嗅球組織;嗅鞘細胞(OECs)是在功能上介于施旺細胞和少突膠質(zhì)細胞之間的一種特殊的膠質(zhì)細胞,具有神經(jīng)營養(yǎng)、抑制膠質(zhì)增生、瘢痕形成、成鞘作用等;為軸突生長提供了適宜的微環(huán)境及較強的遷移的特性,使其成為促進中樞神經(jīng)再生的理想候選細胞之一。嗅鞘細胞是目前所發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)可以再生細胞之一,其特點為終身具有神經(jīng)再生功能,還能夠釋放多種神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)粘附分子。被認為是髓鞘化能力的膠質(zhì)細胞,逐漸用于治療脊髓損傷。嗅鞘細胞與膠質(zhì)細胞、雪旺細胞在表現(xiàn)型上有共同點,它們都能促進軸突的再生,主要區(qū)別在于嗅鞘細胞不但存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng),也存在于外周神經(jīng)中。嗅鞘細胞被認為是一種可塑性很高的細胞,它可表現(xiàn)出多種細胞形態(tài)和細胞表面標(biāo)志,在嗅系統(tǒng)發(fā)育過程中,嗅鞘細胞根據(jù)其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可標(biāo)記大部分在體嗅鞘細胞,然而在嗅球外神經(jīng)層O4陽性嗅鞘細胞仍然可以在P75NTR陽性細胞層內(nèi)分化成E-NCAM陽性的細胞層,還有一定比率的嗅鞘細胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽性。嗅黏膜中的神經(jīng)元是生后才生長并在成年時繼續(xù)分化的神經(jīng)元,壽命為4-12周,隨著新細胞的生長,又建立了新的神經(jīng)支配關(guān)系。嗅鞘細胞存在于嗅神經(jīng)及嗅球的神經(jīng)層上,沿嗅神經(jīng)的全長,從周圍神經(jīng)系統(tǒng)到中樞神經(jīng)分布。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠嗅鞘采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠嗅鞘經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠孕受體(PROGR)ELISAkit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat azidothymidine (AZT) ELISA Kit 大鼠(AZT)試劑盒
HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(Mouseai-IVIgGaibody)ELISAKit小鼠抗IVIgG抗體
飲料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseIerleukin5,IL-5ELISAKit小鼠白介素-5(IL-5)試劑盒規(guī)格:96T/48T
BHLHE41抗體
成纖維細胞生長因子受體4單克隆抗體
CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)
ARF3重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 Protein
CD300C Protein Human 重組人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 蛋白
FGF1 Protein Canine 重組狗 aFGF / FGF1 蛋白
骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)
CD300C Protein Human 重組人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 蛋白
CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
FGF1 Protein Canine 重組狗 aFGF / FGF1 蛋白
ARF3重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 Protein
小鼠嗅鞘細胞大鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 ,英文名: CCK ELISA Kit
Porcine fibrinogen degradation product (FDP) ELISA Kit 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒
ELISA 小鼠Active Caspase-3 進口分裝
CLIAKitforLPL(Humanlipoproteinlipase)ELISAKit人脂蛋白脂酶
通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1)500納克
ELISAKitC3SP雞補體3裂解產(chǎn)物
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