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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:887
更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱:小鼠外周血中性粒細(xì)胞
組織來(lái)源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠外周血中性粒分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞是一類無(wú)色、球形、有核的血細(xì)胞。白細(xì)胞不是一個(gè)均一的細(xì)胞群,根據(jù)其形態(tài)、功能和來(lái)源部位可以分為三大類:粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,分為中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種。中性粒細(xì)胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞質(zhì)呈無(wú)色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細(xì)小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒。細(xì)胞核呈桿狀或2~5分葉狀,葉與葉間有細(xì)絲相連。中性粒細(xì)胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細(xì)胞來(lái)源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒。這些顆粒多是溶酶體,內(nèi)含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。中性粒細(xì)胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,它處于機(jī)體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細(xì)菌入侵的線,具有很強(qiáng)的吞噬活性,可吞噬細(xì)菌、衰老的紅細(xì)胞、抗原一抗體復(fù)合物和壞死的細(xì)胞等。中性粒細(xì)胞內(nèi)含有大量溶酶體酶,因此能將吞噬入細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌和組織碎片分解。當(dāng)中性粒細(xì)胞吞噬數(shù)十個(gè)細(xì)菌后,自身發(fā)生解體,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細(xì)胞是人體內(nèi)壽命最短的細(xì)胞,一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定,48h活性下降,96h基本死亡。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血中性粒采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血中性粒經(jīng)瑞氏染色法,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管內(nèi)皮抑素 (Endostatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
內(nèi)皮素 -1(Endothelin-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
內(nèi)啡肽 - b (Endorphin- b ) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai histone aibody of ai -DNA (H2A-H2B) / two mer -DNA aibody ELISA Kit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體試劑盒
Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 人上皮特異性抗原(ESA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor8-iso-PG(Human8-isoprostaglandin)ELISAKit人8異前列腺素
異丁甲基細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量試劑盒20次
MouseMotilin,MTLELISAKit小鼠胃動(dòng)素(MTL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
1號(hào)染色體開放閱讀框55抗體
TIP41樣蛋白抗體
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原
LRP1重組人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
ALPL Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白
PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原 0.5mgPAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/ DTID-ZJU10/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
ALPL Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPL 蛋白
LRP1重組人 LRP1 / A2MR / CD91 蛋白 (aa 786-1165) Protein
小鼠外周血中性粒細(xì)胞大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒 ,英文名: HIF-1α ELISA Kit
Porcine plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒
廣州管圓線蟲核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLRP-6(Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein)ELISAKit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6
通用HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液100毫升
ELISAKitsICAM-1雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作