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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
組織來(lái)源:胎盤(pán)組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層分離自胎盤(pán)組織;胎盤(pán)(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤(pán)從母體取得營(yíng)養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤(pán)還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類(lèi)和魚(yú)類(lèi)也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱(chēng)假胎盤(pán)。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,稱(chēng)初級(jí)干絨毛。胚外中胚層長(zhǎng)入初級(jí)干絨毛的中軸,使初級(jí)干絨毛變成了次級(jí)干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí),次級(jí)干絨毛改稱(chēng)三級(jí)干絨毛。三級(jí)干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤(pán),而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層經(jīng)Cytokeratin-7免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2 英文名稱(chēng): Rat Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): VEGF-R2
大鼠氧化酶 英文名稱(chēng): Xahine oxidase 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): XOD
小鼠肌動(dòng)蛋白β 英文名稱(chēng): Mouse Actin β 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): ACTβ
小鼠?;碳さ鞍?span> 英文名稱(chēng): Mouse Acylation Stimulating Protein 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): ASP
小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human Coxsackie virus IgG (Cox V-IgG) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgG(Cox V-IgG)試劑盒
Humaacrolimus-FK506ELISAKit 人他(FK506)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Human8-epi-prostaglandinF2alpha0ELISAKit人8-異構(gòu)前列腺素F2α
異檸檬酸待測(cè)樣品處理試劑盒20次
MouseMethylaseELISAKit小鼠甲基化酶(Methylase)試劑盒規(guī)格:96T/48T
單克隆抗體
RNA結(jié)合蛋白LIN28B單克隆抗體
CD302重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
Eukaryotic aspartyl protease(Rice 0.5mgEukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)
FLT1重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 Protein
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白
CA9 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白
Eukaryotic aspartyl protease(Rice 0.5mgEukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白
CD302重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CA9 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白
FLT1重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 Protein
小鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)試劑盒 ,英文名: FASL ELISA Kit
Porcine orexin receptor (OXR) ELISA Kit 豬食欲素受體(OXR)試劑盒
大豆特定基因序列(Lectin)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforLTB(Humanheat-labileeerotoxinBsubunit)ELISAKit人不耐熱腸毒素B亞單位
添加劑同酸比色法定量試劑盒20次
ELISAKitIgG雞免疫球蛋白G
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作