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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔腦膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔腦膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：泛素蛋白連接酶G2抗體 人膀胱平滑肌細(xì)胞 蛛毒素受體2抗體 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)化相關(guān)基因MED11抗體 小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 多巴胺受體調(diào)節(jié)因子DRRF抗體 小鼠肝癌細(xì)胞；H22-H8D8
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：612
更新時(shí)間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔腦膜成纖維細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8398 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。硬腦膜，是一厚而堅(jiān)韌的雙層膜，外層是顱骨內(nèi)面的骨膜，僅疏松地附于顱蓋，特別是在枕部與顳部附著更疏松，稱為骨膜層。蛛網(wǎng)膜是一層半透明的膜，位于硬腦膜深部，其間有潛在性腔隙為硬腦膜下隙。軟腦膜是緊貼于腦表面的一層透明薄膜，并伸入溝裂。在腦室壁的某些部位，軟腦膜及其血管與室管膜上皮共同形成脈絡(luò)組織。脈絡(luò)組織中的血管反復(fù)分支成叢，突入腦室形成脈絡(luò)叢。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦膜成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右；1-2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腦膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血漿游離基因組 Plasma free genomic DNA Exaction Kit
M13單鏈基因組DNA快速提取試劑盒 Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA
λ基因組DNA快速提取試劑盒 Fast exaction kit for phage genomic DNA
超土壤基因組DNA快速提取試劑盒 Rapid exaction kit for genomic DNA in soil
ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體
補(bǔ)體因子H重組兔單克隆抗體
LILRB3重組小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
白介素7(IL7)重組蛋白 Recombinant Interleukin 7 (IL7)
GUCA1A重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N 0.5mgANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
F11R重組小鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
CD68 Protein Rat 重組大鼠 CD68 / Macrosialin 蛋白
PA2G4重組人 EBP1 / PA2G4 蛋白 Protein
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)試劑盒
Humanmelatoninsulfate,MSELISAKit 人硫酸褪黑色素(MS)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforABeta1-40(Mouseamyloidbetapeptide1-40)ELISAKit小鼠β淀粉樣蛋白
乙肝病毒DNA化試劑盒20次
MouseMyoglobin,MYO/MBELISAKit小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔腦膜成纖維細(xì)胞大鼠蛋白激酶B(PKB)試劑盒 ，英文名： PKB ELISA Kit
Porcine serum niic oxide (NO) ELISA Kit 豬血清(NO)試劑盒
ELISA 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE) 分裝
CLIAKitforLp-PL-A2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2
通用細(xì)胞HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液100毫升
ELISAKitFSH雞促卵泡素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
