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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7377 |
細(xì)胞簡介:
小鼠視網(wǎng)膜Muller分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關(guān)注。在超微結(jié)構(gòu)水平上,Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度,更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細(xì)胞形態(tài)也會(huì)有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng),還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復(fù)消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠抗核抗體(mouse ANA) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管緊張素II(mouse ANG II) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)試劑盒 96T/48T
Human soluble fibrin monomer complex (SFMC) ELISA Kit 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)試劑盒
Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor15-LO/LOX(Human15-lipoxygenase)ELISAKit人15脂加氧酶
飲料離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次
MouseLDL-ICELISAKit小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶2重鏈抗體
PE標(biāo)記小鼠CD16/32單克隆抗體
IL2重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 Protein
HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene 0.5mgHCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨細(xì)胞病毒UL49抗原
IL17F重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白 Protein
CD27 Protein Human 重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ENPP7 Protein Mouse 重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白
HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene 0.5mgHCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨細(xì)胞病毒UL49抗原
CD27 Protein Human 重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL2重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 Protein
ENPP7 Protein Mouse 重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白
IL17F重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白 Protein
小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞大鼠多巴胺D1受體(D1R)試劑盒 ,英文名: D1R ELISA Kit
Porcine heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
蟹特定基因序列(Cytb)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforLTD4(HumanleukoieneD4)ELISAKit人白三烯D4
體液總巰基含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitGH雞生長因子