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更新時間:2024-11-05
大鼠尾動脈內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
尾動脈 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8267 |
細胞簡介:
大鼠尾動脈內皮分離自尾動脈組織;尾動脈是鼠尾的主要血管,尾部主要大血管分布表淺,尾側靜脈適于注射給藥,尾正中動脈適于動脈采血、練習顯微外科血管吻合技術等,實際應用相當普遍。許多動物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富,供血來源于薦中動脈和臀上動脈兩個動脈,形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結合的特點,尾部淺層 3 套縱向動靜脈系統(tǒng),鼠尾背側為不規(guī)則動靜脈鏈狀結構,深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通,且呈動靜脈血管徑不匹配的特點。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈。其在尾部依尾橫動脈形成溝通。尾橫動脈呈尾椎節(jié)段性分布,直接溝通尾正中動脈、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷后,可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側靜脈明顯大于伴隨的動脈,而正中動脈明顯大于伴隨的靜脈,形成供血主要來自腹面的尾正中動,回血主要依靠兩側的尾側靜脈,符合腹面動脈保護的安全性,同時利于血管散熱,尾橫動脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻[王蕾,葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結構與鼠尾的生理功能探討]。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠尾動脈內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠尾動脈內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠尾動脈內皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒 96T/48T
小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒 96T/48T
小鼠促甲狀腺素(TSH)試劑盒 96T/48T
小鼠促黃體激素(LH)試劑盒 96T/48T
小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human bactericidal peptide (cecropin) ELISA Kit 人殺菌肽(cecropin)試劑盒
HumancecropinELISAKit 人殺菌肽(cecropin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgA試劑盒人抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物甲基化組蛋白H3-K9染色質免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit人鈣離子通道抗體(VGCC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD74單克隆抗體
鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白1抗體
IL17A重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽 0.2mgNociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原)
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
EMC8 Protein Human 重組人 EMC8 / COX4NB / NOC4 蛋白
SELP Protein Mouse 重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽 0.2mgNociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原)
EMC8 Protein Human 重組人 EMC8 / COX4NB / NOC4 蛋白
IL17A重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
SELP Protein Mouse 重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠尾動脈內皮細胞大鼠白介素26(IL-26)試劑盒 ,英文名: IL-26 ELISA Kit
Mouse leukoiene C4 (LTC4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒
ELISA 小鼠IgG(mouse IgG) 進口分裝
CLIAKitforIL-9ELISAKit大鼠白介素9
通用型果膠生物酶比色法定量試劑盒20次
ELISAKitAChRab大鼠乙酰受體抗體