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更新時間:2024-11-05
大鼠前列腺微血管內皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
前列腺 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8255 |
細胞簡介:
大鼠前列腺微血管內皮分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實質性器宮,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分;作為內分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。微血管是極細微的血管,管徑平均為6-9μm,連于動、靜脈之間,互相連接成網狀。微血管壁薄,管徑較小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液與組織之間進行物質交換。其管壁主要由一層內皮細胞構成,在內皮外面有一薄層結締組織。另外還常可見到一種扁而有突起的細胞貼在微血管的管壁外面,稱為周細胞。每一次性活動都會造成前列腺的充血,促使微血管不斷擴張而壓迫腺體造成淤積,體外培養(yǎng)前列腺微血管內皮,對于研究前列腺炎癥,炎癥發(fā)生機理有重要的意義。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠前列腺微血管內皮采用膠原酶 - 混合消化法結合密度梯度離心法,最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠前列腺微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代;不建議多次傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠前列腺微血管內皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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豬-葡萄糖共轉運載體1(SGLT1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
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Humancomplemeconolprotein,CCPELISAKit 人補體調節(jié)蛋白(CCP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Histoneaibody,AHA試劑盒人抗組蛋白抗體(AHA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量試劑盒20次
HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit人血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF750標記的二甲基化組蛋白H3K4抗體
磷脂酰肌醇激酶調節(jié)亞單位gamma重組兔單克隆抗體
UCHL3重組大鼠 UCHL3 蛋白 Protein
HCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原 0.5mgHCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原)
SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 Protein
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (aa 565-984, His & GST 標簽)
LRIG1 Protein Mouse 重組小鼠 LRIG1 / LIG-1 蛋白
HCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原 0.5mgHCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原)
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (aa 565-984, His & GST 標簽)
UCHL3重組大鼠 UCHL3 蛋白 Protein
LRIG1 Protein Mouse 重組小鼠 LRIG1 / LIG-1 蛋白
SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 Protein
大鼠前列腺微血管內皮細胞大鼠白介素33(IL-33)試劑盒 ,英文名: IL-33 ELISA Kit
Mouse ierleukin 27 (IL-27) ELISA Kit 小鼠白介素27(IL-27)試劑盒
ELISA 小鼠高遷移率族蛋白(mouse HMGB1) 進口分裝
CLIAKitforINH-BGH(MouseinhibinB)ELISAKit小鼠抑制素B
通用型甘蔗白條病(Xahomonasalbilineans;Xalb)試劑盒20次
ELISAKitiNOS大鼠誘導型合成酶
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行