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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-05
大鼠關節(jié)囊成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
關節(jié)囊 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8234 |
細胞簡介:
大鼠關節(jié)囊成纖維分離自關節(jié)囊組織;關節(jié)囊(articular capsule)是由結締組織構成的膜囊,附著于關節(jié)的周圍,密封關節(jié)腔。關節(jié)囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內(nèi)層為滑膜層。纖維層實際上是一個連結骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纖維層厚而堅韌,由致密結締組織構成,含有豐富的血管和神經(jīng)。其淺層纖維多呈縱行排列;深層纖維主要為環(huán)行纖維。纖維層的厚薄,各個關節(jié)不相同,即是在同一關節(jié)中,各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關節(jié)中,都較厚而緊張,相反,于運動靈活的關節(jié),則較薄而松弛。有的關節(jié)囊的部分纖維囊缺如,僅一層滑膜層;有的部分明顯增厚,形成韌帶?;颖《釢?,是由疏松結締組織構成,襯在纖維層內(nèi)面,周緣附著在關節(jié)軟骨的邊緣。它朝向關節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮,此面上蓋有一層內(nèi)皮細胞。滑膜向關節(jié)腔分泌滑液,滑液是稍粘稠而透明的液體,可減少關節(jié)中相連骨的摩擦,是一種滑潤劑。滑膜表面可形成絨毛或皺襞突入關節(jié)腔內(nèi)。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,形成滑膜囊,常位于肌腱與骨面之間。有時滑膜層突出不明顯,僅呈深窩狀,稱為囊狀隱窩。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠關節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠關節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠關節(jié)囊成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠低氧誘導因子1α(mouse HIF-1α) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠組胺(mouse HIS) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠肝生素(mouse HGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human papilloma virus aibody IgG (HPV-IgG) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒
Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit 人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM試劑盒人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物黑色素含量比色法定量試劑盒20次
Humanα-enolase,αENOLELISAKit人α烯醇化酶(αENOL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
胞漿蛋白SH3GL3抗體
磷酸化14-3-3E蛋白抗體
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)
PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein
大鼠關節(jié)囊成纖維細胞大鼠白細胞介素18(IL-18)試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒
MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit人NOD樣受體
同位素真菌/酵母細胞蛋白核酸結合凝膠遷移電泳分析試劑盒20次
ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受體
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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