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廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量:2854
更新時(shí)間:2024-09-12
操作步驟:
1)活化素Aelisa試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過(guò)久,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
anti- ALG13 antibody大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒
anti- ALG5 antibody大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒
anti- ALG6 antibody大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒
anti- ALK,CD246 antibody大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒
anti- ALK,CD246 antibody大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒
anti- ALKBH1 antibody大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
anti- ALKBH3 antibody大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒
anti- ALKBH4 antibody大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
anti- ALKBH5 antibody大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
anti- ALKBH7 antibody大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒
anti- ALLC antibody大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
anti- alpha 1 Antichymotrypsin/AACT antibody大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒
anti- alpha 1 Antichymotrypsin/AACT antibody大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒
anti- Alpha actin antibody大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒
anti- Alpha actin antibody大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒
活化素Aelisa試劑盒大鼠Caspase-2(rat Caspase-2)Human IFI44(Interferon-induced protein 44) ELISA Kit
Human FEM1A(Protein fem-1 homolog A) ELISA Kit
大鼠Caspase-3(rat Caspase-3)Human SORCS1(VPS10 domain-containing receptor SorCS1) ELISA Kit
Human C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106) ELISA Kit
大鼠Caspase-9(rat Caspase-9)Human DKKL1(Dickkopf-like protein 1) ELISA Kit
Human TRIM22(E3 ubiquitin-protein ligase TRIM22) ELISA Kit
大鼠Caspase-13(rat Caspase-13)Human PRSS22(Brain-specific serine protease 4) ELISA Kit
Human B7H6(B7 homolog 6) ELISA Kit
大鼠膽囊收縮素(rat CCK-8)Human WNT10A(Protein Wnt-10a) ELISA Kit
Human RGS19(Regulator of G-protein signaling 19) ELISA Kit
大鼠二級(jí)淋巴組織趨化因子(rat CCL21)Human ZFP36(Tristetraprolin) ELISA Kit
Human WNT7B(Protein Wnt-7b) ELISA Kit
大鼠趨化因子受體6(rat CCR6)Human WNT7A(Protein Wnt-7a) ELISA Kit
Human WNT10B(Protein Wnt-10b) ELISA Kit
大鼠趨化因子受體7(rat CCR7)Human TTF2(Transcription termination factor 2) ELISA Kit
Human TCF7L2(Transcription factor 7-like 2) ELISA Kit
大鼠粘附分子CD44 (rat CD44)Human TBX21(T-box transcription factor TBX21) ELISA Kit
Human KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit
大鼠Chemerin(rat Chemerin)Human SORL1(Sortilin-related receptor) ELISA Kit
Human RPL13(60S ribosomal protein L13) ELISA Kit
大鼠肌酸激酶(rat CK)Human REPS2(RalBP1-associated Eps domain-containing protein 2) ELISA Kit
Human HSD17B10(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase type-2) ELISA Kit
大鼠肌酸激酶同工酶(rat CK-MB)Human RAB10(Ras-related protein Rab-10) ELISA Kit
Human LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit
大鼠Clusterin(rat Clusterin)Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit
Human LPPR4(Lipid phosphate phosphatase-related protein type 4) ELISA Kit
大鼠II型膠原蛋白(rat Collagen II)Human NBR1(Next to BRCA1 gene 1 protein) ELISA Kit
Human ILVBL(Acetolactate synthase-like protein) ELISA Kit
大鼠II型膠原C端肽(rat CTX-II)Human HIST2H2BE(Histone H2B type 2-E) ELISA Kit
Human DNAH17(Dynein heavy chain 17, axonemal) ELISA Kit
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。