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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：G蛋白偶聯(lián)受體MRGX2蛋白抗體 EHD2蛋白抗體 乙酰轉(zhuǎn)移酶13抗體 大鼠表皮黑色素細(xì)胞 豬脂肪細(xì)胞 幼蚊細(xì)胞；C6/36 RS1 (大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：71
更新時(shí)間：2024-10-27
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
股骨、脛骨組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細(xì)胞 | YS-01X7495 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干分離自股骨、脛骨；骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜，覆蓋在骨的表面（關(guān)節(jié)面除外），新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色，含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細(xì)胞。此外，附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng)，通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層，外層主要是粗大的膠原纖維束，部分纖維穿入骨質(zhì)，使骨內(nèi)膜固定于骨面；內(nèi)層疏松，含成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞（分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能）。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜，叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的能力，以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì)，所以對(duì)骨的發(fā)生、生長(zhǎng)、修復(fù)等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
方法簡(jiǎn)介：
見說明
質(zhì)量檢測(cè)：
本公司生產(chǎn)的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；經(jīng)CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
DMEM-F12、FBS、間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)檢測(cè)試劑盒
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeni-iodothyronine,T3檢測(cè)試劑盒雞三甲狀腺原(T3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞TNFALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
血紅蛋白ε抗體
PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD90單克隆抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白
CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白
PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽
CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒
Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)檢測(cè)試劑盒
Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶
血液離子(K)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
