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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-30
人表皮成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7554 |
細胞簡介:
人表皮成纖維分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人表皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人表皮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠β基己糖苷酶試劑盒 小鼠β基己糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠β基己糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β基己糖苷酶試劑盒、小鼠β基己糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒 小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒、小鼠前列腺酸性0酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠糖原合成酶激酶試劑盒 小鼠糖原合成酶激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠糖原合成酶激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠糖原合成酶激酶試劑盒、小鼠糖原合成酶激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠雄烯二試劑盒 小鼠雄烯二試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠雄烯二試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠雄烯二試劑盒、小鼠雄烯二eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
Human neuronal apoptosis inhibitory protein (NAIP) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒
humanParathyroidhormone,PTHELISAKit 人甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAi-nuclearAibody,ANA試劑盒人抗核抗體(ANA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)總活性比色法定量試劑盒20次
HumanulaEsiol,uE3ELISAKit人超敏游離雌三醇(uE3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體
核苷酸轉(zhuǎn)氫酶抗體
ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原
IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標簽) Protein
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標簽)
Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原
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ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標簽)
IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標簽) Protein
人表皮成纖維細胞大鼠抑制素βA(INHβA)試劑盒 ,英文名: INHβA ELISA Kit
Mouse immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒
MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhumandopamine,DAELISAKIT人多巴胺
細胞ABL1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitEPO大鼠紅細胞生成素