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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:44
更新時間:2024-10-30
人大隱靜脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
大隱靜脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7300 |
細胞簡介:
人大隱靜脈平滑肌分離自大隱靜脈;大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端,經(jīng)內(nèi)踝前方,沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行,經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方,進入大腿內(nèi)側(cè)部,與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行,逐漸向前上,在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔,匯入股靜脈,其匯入點稱為隱股點。有5條屬支:旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈,它們匯入大隱靜脈的形式多樣,相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時,須分別結(jié)扎、切斷各屬支,以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能:①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素;②參與血管壁的炎癥反應(yīng),并與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。因此,研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人大隱靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人大隱靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
唾液酸(SA)測試盒(帶SA標準) Saliva acid (SA) test case (with SA standard)
肝素溶液 Heparin solion
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
小鼠(CH)試劑盒 96T/48T
Human placeal lactogen (PL) ELISA Kit 人胎盤泌乳素(PL)試劑盒
Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 人抗復(fù)合物(TAT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanazurocidin,AZU試劑盒人天青殺素(AZU)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料大豆試劑盒20次
Humahrombin,TMELISAKit人(TM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化轉(zhuǎn)錄生長因子SP1抗體
有絲分裂控制蛋白dis3抗體
KIT重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細胞生長因子4抗原
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
FGFR2 Protein Human 重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 標簽)
EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細胞生長因子4抗原
FGFR2 Protein Human 重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 標簽)
KIT重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
人大隱靜脈平滑肌細胞大鼠胰淀素(IAPP)試劑盒 ,英文名: IAPP ELISA Kit
Mouse endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancyclophilinA,CyPAELISAKit人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A
細胞ATP生物發(fā)光法定量試劑盒50次
ELISAKitCasp-3大鼠胱天蛋白酶3
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