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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人滑膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人滑膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：整合素β8抗體 分泌球蛋白樣蛋白抗體 蛋白磷酸酶2A-B55α抗體 人角膜內(nèi)皮細(xì)胞 兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 Z-138人套細(xì)胞淋巴瘤 A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：52
更新時(shí)間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人滑膜成纖維細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
滑膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7698 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人滑膜成纖維分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎（OA）以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變?；ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的細(xì)胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無(wú)定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細(xì)胞）、B型（成纖維樣滑膜細(xì)胞）以及C型（樹(shù)突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞）細(xì)胞組成。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人滑膜成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人滑膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白介素 -5 (mouse IL-5) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國(guó) Biosource
小鼠白介素 -6 (mouse IL-6) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 法國(guó) Diaclone
小鼠白介素 -7(mouse IL-7) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國(guó) R&D
小鼠白介素 -10 (mouse IL-10) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 法國(guó) Diaclone
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai myocardial aibody (AMA) ELISA Kit 人抗心肌抗體(AMA)試劑盒
HumanCyclophosphamide,CTXELISAKit 人對(duì)環(huán)0酰胺(CTX)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA/CENP(HumanAicenomereAibody)ELISAKit人抗著絲點(diǎn)抗體
一步法-PCR試劑盒20/50次
MouseOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit小鼠骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
乳腺癌易感基因環(huán)狀結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)
APOA1 Protein Mouse 重組小鼠 ApoA1 蛋白
MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
APOA1 Protein Mouse 重組小鼠 ApoA1 蛋白
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
人滑膜成纖維細(xì)胞大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGFB)試劑盒 ，英文名： VEGFB ELISA Kit
Mouse iact parathyroid hormone (i-PTH) ELISA Kit 小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒
Mousesolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAkit 小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhumanAzidothymidine,AZTELISAKit人
細(xì)胞EPHA3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPKB大鼠蛋白激酶B
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