服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:47
更新時間:2024-10-30
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人腎動脈平滑肌細(xì)胞
組織來源:腎動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
人腎動脈平滑肌分離自腎動脈組織;腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機(jī)能血管,與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng):腎小球毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的人腎動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人腎動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞毒 T 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
結(jié)締組織生長因子 (CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
心肌營養(yǎng)素 -1(CT-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
心肌鈣蛋白 I(cTnI) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠(AZT)ELISA 試劑盒
Human acid sphingomyelinase (ASM) ELISA Kit 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)試劑盒
Humanplateletfactor3,PF3ELISAKit 人血小板因子3(PF-3)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5試劑盒人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)試劑盒
植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量試劑盒(包括萃取)20次
HumahyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit人促甲狀腺素(TSH)試劑盒
乙醛脫氫酶16家庭A1抗體
piwi樣1蛋白抗體
EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Apo-E (Apolipoprotein E 0.5mgApo-E (Apolipoprotein E) 載脂蛋白E(抗原)
CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein
FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
REG3A Protein Rat 重組大鼠 REG3A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Apo-E (Apolipoprotein E 0.5mgApo-E (Apolipoprotein E) 載脂蛋白E(抗原)
FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
REG3A Protein Rat 重組大鼠 REG3A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein
人腎動脈平滑肌細(xì)胞大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)試劑盒 ,英文名: FGF1 ELISA Kit
Mouse ferritin (FE) ELISA Kit 小鼠鐵蛋白(FE)試劑盒
ratEndothelin1,ET-1ELISAKit 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhiston-H2bELISAKit大鼠組蛋白H2b
細(xì)胞ROCK-I激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPⅢNP大鼠Ⅲ型前膠原肽
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作