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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人腎小管上皮細胞

產(chǎn)品簡介:

人腎小管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:鈣激活鉀通道蛋白β4抗體 FBXL22蛋白抗體 Rho GTP酶激活蛋白5抗體 人食管成纖維細胞 人子宮肌瘤組織源細胞 SNU-333人腎細胞癌細胞 SK-MEL-1 (人皮膚黑色素瘤細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:48

更新時間:2024-10-30

產(chǎn)品特性Product characteristics

人腎小管上皮細胞

人腎小管上皮細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

腎組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

上皮細胞樣

YS-01X7580

細胞簡介:

人腎小管上皮分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi),于腎小體附近高度蟠曲;遠端小管曲部也稱為遠曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞,腎小管上皮細胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術,目前該分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能:①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進入終尿;③細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子,通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應;④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2RMHC-Ⅱ類抗原,這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對腎間質(zhì)纖維化機制研究的日漸加深,腎小管上皮細胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細胞模型,在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。

方法簡介:

公司實驗室分離的人腎小管上皮細胞 采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的人腎小管上皮細胞 經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

人腎小管上皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人腎小管上皮細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒   96T/48T

神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒   96T/48T

熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)試劑盒   96T/48T

腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒   96T/48T

豚鼠生長激素(GH)試劑盒 ,英文名: GH ELISA Kit

Human nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 人的神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒

MonkeyLaminin,LNELISAKit層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBLAPELISAKit(Rabbit)兔骨堿性0酸酶試劑盒

細菌耐酸(ACID-FAST)染色試劑盒50

rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit兔子巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒規(guī)格:96T/48T

抑癌基因p16抗體

RASGEF1B蛋白抗體

HAVCR2重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)重組蛋白 Recombinant Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)

NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 Protein

IL13RA1 Protein Human 重組人 IL13RA1 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)重組蛋白 Recombinant Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)

IL13RA1 Protein Human 重組人 IL13RA1 蛋白

HAVCR2重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 Protein

人腎小管上皮細胞大鼠速激肽受體2(TACR2)試劑盒 ,英文名: TACR2 ELISA Kit

Mice of homocysteine (Hcy) ELISA Kit 小鼠同型半胱(Hcy)試劑盒

ratCoicosterone,COELISAKit 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHIS(MouseHistamine)ELISAKit小鼠組胺

細胞ROCK激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitPⅢ大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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