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更新時間:2024-10-30
人胃癌組織源成纖維細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胃癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7476 |
細胞簡介:
人胃癌組織源成纖維分離自胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,在我國各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,胃癌發(fā)病有明顯的地域性差別,在我國的西北與東部沿海地區(qū)胃癌發(fā)病率比南方地區(qū)明顯為高。好發(fā)年齡在50歲以上,男女發(fā)病率之比為2:1。由于飲食結構的改變、工作壓力增大以及幽門螺桿菌的感染等原因,使得胃癌呈現年輕化傾向。胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,其中半數以上發(fā)生于胃竇部,胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累。絕大多數胃癌屬于腺癌,早期無明顯癥狀,或出現上腹不適、噯氣等非特異性癥狀,常與胃炎、胃潰瘍等胃慢性疾病癥狀相似,易被忽略,因此,目前我國胃癌的早期診斷率仍較低。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
公司實驗室分離的人胃癌組織源成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人胃癌組織源成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠金屬硫蛋白(MT)試劑盒 96T/48T
小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 96T/48T
小鼠解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)試劑盒 96T/48T
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 96T/48T
小鼠流行性出血熱抗體(EHF-Ab)試劑盒 96T/48T
Rat keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 大鼠角化細胞內分泌因子(KAF)試劑盒/雙調蛋白(AR)試劑盒
Humaenascin-R,TN-RELISAKit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanActivinA,ACV-A試劑盒人活化素A(ACV-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂質過氧化物(linoleicacid)ELISA定量測定試劑盒48/96次
MouseAndrostenedione,ASDELISAKit小鼠雄烯二同(ASD)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白酶H重連抗體
超氧化物歧化酶1(銅/鋅過氧化物歧化酶SOD抗體
ACVR1重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 Protein
NRF-1(nuclear respiratory factor-1 0.5mgNRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原
NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 285-413, His 標簽) Protein
CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白
IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白
NRF-1(nuclear respiratory factor-1 0.5mgNRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原
CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白
ACVR1重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 Protein
IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白
NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 285-413, His 標簽) Protein
人胃癌組織源成纖維細胞大鼠神經疾病靶標酯酶(E)試劑盒 ,英文名: E ELISA Kit
Mouse plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒
RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit 大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHbC(HumanHemoglobinC)ELISAKit人血紅蛋白C
細胞半胱蛋白酶-3(CASPASE-3)活性熒光定量試劑盒20次
RatVitaminD2,VD2ELISAKit大鼠2(VD2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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