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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:41
更新時間:2024-10-30
人心臟纖維原細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7593 |
細胞簡介:
人心臟纖維原分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時,纖維細胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,高爾基復合體不發(fā)達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質(zhì)較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負責細胞基質(zhì)外的合成,當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。
方法簡介:
公司實驗室分離的人心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human rotavirus aigen (RV Ag) ELISA Kit 人輪狀病毒抗原(RV Ag)試劑盒
HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Duckcarbonicanhydrase,CA試劑盒鴨子酶(CA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡試劑盒(針對二甲基、基)10/20次
MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit小鼠多巴胺D1受體(D1R)試劑盒規(guī)格:96T/48T
9號染色體開放閱讀框72抗體
電壓門控鈉離子通道型α4抗體
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
人心臟纖維原細胞大鼠乳酸脫氫酶B(LDHB)試劑盒 ,英文名: LDHB ELISA Kit
Mouse vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGzms-B(MousegranzymesB)ELISAKit小鼠顆粒酶B
細胞二(MDA)比色法定量試劑盒50次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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