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更新時(shí)間:2024-10-31
人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
子宮組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7674 |
細(xì)胞簡介:
人子宮內(nèi)膜間質(zhì)分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nèi)層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜間質(zhì)采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
雙向調(diào)節(jié)蛋白 英文名稱: Amphiregulin 規(guī)格: 英文縮寫: AR
固 英文名稱: Aldosterone 規(guī)格: 英文縮寫: Aldosterone
白細(xì)胞活化黏附因子 英文名稱: Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule 規(guī)格: 英文縮寫: ALCAM
膜聯(lián)蛋白5 英文名稱: Annexin 5 規(guī)格: 英文縮寫: ANXA-5
豚鼠胰島素樣生長因子2(IGF2)試劑盒 ,英文名: IGF2 ELISA Kit
Human Chlamydia pneumoniae aibody (Cpn-Ab) ELISA Kit 人肺衣原體抗體(Cpn-Ab)試劑盒
rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBcl3(humanB-cellleukemia/lymphoma3)ELISAKit人B細(xì)胞淋巴瘤因子3
纖維蛋白溶酶(PLASMIN)活性比色法定量試劑盒20次
RabbitCoisolELISAKit兔子(Coisol)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FITC標(biāo)記人CD68單克隆抗體
核糖體蛋白S4Y抗體
CD48重組大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原 0.5mgER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)
CD4重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (aa 1-208, His 標(biāo)簽) Protein
IgG1 Protein Human 重組人 IgG1 Fc 蛋白
CD99 Protein Mouse 重組小鼠 CD99 / PILR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原 0.5mgER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)
IgG1 Protein Human 重組人 IgG1 Fc 蛋白
CD48重組大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD99 Protein Mouse 重組小鼠 CD99 / PILR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CD4重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (aa 1-208, His 標(biāo)簽) Protein
人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制因子(Vaspin)試劑盒 ,英文名: Vaspin ELISA Kit
Monkey ierferon gamma (IFN- gamma) ELISA Kit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒
Ratlipoproteinα,Lp-αELISAKit 大鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGlyCAM-1(Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1)ELISAKit人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子
細(xì)胞非蛋白/游離巰基含量熒光定量試劑盒20次
RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒規(guī)格:96T/48T