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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量:47
更新時(shí)間:2024-10-31
兔骨細(xì)胞
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔骨體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
骨 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7797 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔骨分離自骨組織;骨組織的細(xì)胞成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi),其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。骨細(xì)胞(Osteocyte)是人體骨骼中最主要的細(xì)胞成分。在成年人骨骼中,骨細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的90%~95%,大約是成骨細(xì)胞數(shù)量的20倍。骨細(xì)胞生長(zhǎng)在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細(xì)胞的細(xì)胞體呈梭形或類(lèi)圓形,位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi)。與神經(jīng)細(xì)胞類(lèi)似,每個(gè)骨細(xì)胞具有大量向外延伸的突觸,而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中。通過(guò)這些突觸,骨細(xì)胞能夠與骨表面的細(xì)胞、周?chē)渌墓羌?xì)胞進(jìn)行“交流"。普遍認(rèn)為,骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的終末階段,成骨細(xì)胞將可能有3種不同的歸宿:分化成為骨細(xì)胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動(dòng)的成骨細(xì)胞、進(jìn)入程序死亡過(guò)程(凋亡)。骨細(xì)胞為扁橢圓形多突起的細(xì)胞,核亦扁圓、染色深。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下,胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基復(fù)合體亦不發(fā)達(dá)。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中,骨細(xì)胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔,稱為骨陷窩,其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液,骨細(xì)胞從中獲得養(yǎng)分。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒 96T/48T
小鼠瘤病毒18(HPV-18)試劑盒 96T/48T
小鼠瘤病毒16(HPV-16)試劑盒 96T/48T
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai thymocyte globulin (ATG) ELISA Kit 人抗細(xì)胞球蛋白(ATG)試劑盒
HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit 人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAC-1(Humanadenylylcyclase1)ELISAKit人腺苷酸環(huán)化酶1
(NO)終點(diǎn)比色法定量試劑盒100次
MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
NKR-P1G抗體
精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體
COLEC12重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein
Integrin alpha V 巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子αV多肽 0.5mgIntegrin alpha V 巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子αV多肽
CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein
ESD Protein Human 重組人 Esterase D / ESD 蛋白
CD55 Protein Mouse 重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白
Integrin alpha V 巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子αV多肽 0.5mgIntegrin alpha V 巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子αV多肽
ESD Protein Human 重組人 Esterase D / ESD 蛋白
COLEC12重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein
CD55 Protein Mouse 重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白
CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein
兔骨細(xì)胞大鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)試劑盒 ,英文名: ANKRD1 ELISA Kit
Mouse insulin like growth factor binding protein 1 (IGFBP-1) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒
Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGEF(HumanGuanineExchangeFactor)ELISAKit人鳥(niǎo)苷酸交換因子
細(xì)胞甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T