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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：LSM14A蛋白抗體 鋅指蛋白450抗體 可溶性附著蛋白β-SNAP抗體 兔牙周膜干細(xì)胞 人宮頸癌成纖維細(xì)胞 NCI-H1563人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 Hep G2 (人肝癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：47
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
小腸 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7984 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔小腸隱窩上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門(mén)與胃相通，下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門(mén)，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后，基本上完成了消化過(guò)程，同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能，其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門(mén)附近開(kāi)始出現(xiàn)，在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達(dá)，向下逐漸減少和變矮，至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細(xì)小的腸絨毛，是由上皮和固有層向腸腔突起而成，形狀不一，以十二指腸和空腸頭段達(dá)。絨毛于十二指腸呈葉狀，于空腸呈指狀，于回腸則細(xì)而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴(kuò)大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺，又稱腸隱窩，故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的，小腸腺直接開(kāi)口于腸腔。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小腸隱窩上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小腸隱窩上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔小腸隱窩上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠趨化因子(mouse RAES) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(mouse sRANKL) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain (IgH) ELISA Kit 重鏈(IgH)試劑盒
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Fishi-iodothyronine,T3試劑盒魚(yú)類三甲狀腺原(T3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
ARCH抗體
溶質(zhì)載體家族蛋白20成員A1抗體
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細(xì)胞抗原
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細(xì)胞抗原
COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)試劑盒 ，英文名： MMP9 ELISA Kit
Mouse ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 大鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFAS/CD95ELISAKit大鼠凋亡相關(guān)因子
細(xì)胞甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次
RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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