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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-04
兔羊膜上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7171 |
細(xì)胞簡介:
兔羊膜上皮分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬補(bǔ)體蛋白3試劑盒 豬補(bǔ)體蛋白3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬補(bǔ)體蛋白3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬補(bǔ)體蛋白3試劑盒、豬補(bǔ)體蛋白3eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬表皮生長因子試劑盒 豬表皮生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬表皮生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬表皮生長因子試劑盒、豬表皮生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬白血病抑制因子受體試劑盒 豬白血病抑制因子受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬白血病抑制因子受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白血病抑制因子受體試劑盒、豬白血病抑制因子受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬白細(xì)胞介素15試劑盒 豬白細(xì)胞介素15試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬白細(xì)胞介素15試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白細(xì)胞介素15試劑盒、豬白細(xì)胞介素15eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/OCN/BGP)ELISA 試劑盒
Human connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)試劑盒
PorcineHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit 豬熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha-FodrinIgG/IgA(Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA)ELISAKit人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA
血液精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Pisumsativumagglinin,PSAELISAKit豌豆凝集素(PSA)試劑盒
DISC1 N端抗體
腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體
HEPACAM2重組大鼠 HepaCAM2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2 0.5mgGABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基A型受體B2抗原
FLRT1重組人 FLRT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白
LY9 Protein Mouse 重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2 0.5mgGABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基A型受體B2抗原
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白
HEPACAM2重組大鼠 HepaCAM2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
LY9 Protein Mouse 重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FLRT1重組人 FLRT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
兔羊膜上皮細(xì)胞大鼠肌紅蛋白(MYO)試劑盒 ,英文名: MYO ELISA Kit
Rat 1,3- beta D Pouguese glucosidase (1,3- beta D glucosidase) ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)試劑盒
RatCathepsinK,cath-KELISAKit 大鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforET3游離三甲狀腺原T3
細(xì)胞賴羥化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒
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