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更新時間:2024-11-04
小鼠肝動脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝動脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7142 |
細胞簡介:
小鼠肝動脈平滑肌分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈平滑肌細胞是肝動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。肝動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素,最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠肝動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠肝動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物RNA提取試劑盒(溶液法) 24ml
PlanNAplus 40ml
質(zhì)粒大量提取試劑盒 5T
PlasmidMaxiKit 10T
植物D3(VD3)ELISA 試劑盒
Human ai liver cytosolaibody type 1 (LC1) ELISA Kit 人抗肝細胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)試劑盒
Porcinegrowthhormone,GHELISAKit 豬生長激素(GH)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP-L1ELISAKit小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1
血液E高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mousethrombospondin1,TSP-1ELISAKit小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒
S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體
信號通路Wnt4單克隆抗體
CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein
血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)重組蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ADAM12 Protein Human 重組人 ADAM12 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168)
血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)重組蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)
ADAM12 Protein Human 重組人 ADAM12 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein
GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168)
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠肝動脈平滑肌細胞大鼠果糖二0酸縮酶A(ALDOA)試劑盒 ,英文名: ALDOA ELISA Kit
Rat apoptosis inducing protein BH3 domain (Bid) ELISA Kit 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)試劑盒
RatToll-likereceptor4,TLR4ELISAKit 大鼠Toll樣受體4(TLR4)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforENA-78/CXCL5(HumanEpithelialneuophilactivatingpeptide78)ELISAKit人上皮粒細胞活化肽78
細胞鎂離子濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次
RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒
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