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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-04
小鼠肝實質(zhì)細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7134 |
細胞簡介:
小鼠肝實質(zhì)分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實質(zhì)細胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質(zhì)細胞屬于中高度分化細胞,生長營養(yǎng)需求高,在體外存活時間短;細胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠肝實質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復低速離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠肝實質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬試劑盒 豬試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬試劑盒、豬試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人P糖蛋白試劑盒 人P糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人P糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人P糖蛋白試劑盒、人P糖蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人P27蛋白試劑盒 人P27蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人P27蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人P27蛋白試劑盒、人P27蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人CD30分子試劑盒 人CD30分子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人CD30分子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人CD30分子試劑盒、人CD30分子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒
Human dysophin (dysophin) ELISA Kit 人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)試劑盒
RabbitThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 兔血栓素B2(TXB2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-PIVIgG(HumanPoliomyelitisVirus)ELISAKit人抗副流感病毒IgG抗體
血液5-焦0酸甲戊二羥酸脫羧酶(mevalonate5-pyrophosphatedecarboxylase)活性比色法定量試劑盒20次
PorcineImmunoglobulinG,IgGELISAKit豬免疫球蛋白G(IgG)試劑盒
TATA結(jié)合蛋白抗體
血管內(nèi)皮鋅指蛋白1抗體
FHIT重組人 Fragile histidine triad / FHIT 蛋白 (His 標簽) Protein
SSTR1 (somatostatin receptor 1 0.5mgSSTR1 (somatostatin receptor 1) 受體1(SSTR1)抗原
YWHAB重組人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein
BIRC7 Protein Human 重組人 BIRC7 / Livin 蛋白 (His 標簽)
SERPINA1 Protein Human 重組人 SerpinA1 / A1AT 蛋白 (His 標簽)
SSTR1 (somatostatin receptor 1 0.5mgSSTR1 (somatostatin receptor 1) 受體1(SSTR1)抗原
BIRC7 Protein Human 重組人 BIRC7 / Livin 蛋白 (His 標簽)
FHIT重組人 Fragile histidine triad / FHIT 蛋白 (His 標簽) Protein
SERPINA1 Protein Human 重組人 SerpinA1 / A1AT 蛋白 (His 標簽)
YWHAB重組人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein
小鼠肝實質(zhì)細胞大鼠胱抑素D(CST5)試劑盒 ,英文名: CST5 ELISA Kit
Rabbit lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 兔脂蛋白α(Lp-α)試劑盒
無形體核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-5ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitVE犬E
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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