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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
小鼠胚胎肝母細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠胚胎肝母細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：MOGAT3蛋白抗體 鋅指蛋白471抗體 乙?；疶RIM29蛋白抗體 小鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞 大鼠前列腺成纖維細(xì)胞 PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化 HUVEC+GFP人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化+GFP
產(chǎn)品型號(hào)：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：54
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠胚胎肝母細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
胚胎；肝臟 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7651 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠胚胎肝母分離自胚胎肝組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細(xì)胞（一種多潛能干細(xì)胞）。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠，前腸的原始上皮細(xì)胞接觸心肌中胚層后快速增殖，形成肝原基。大約1d后，原始上皮細(xì)胞侵入原始橫膈，繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細(xì)胞，這些細(xì)胞先表達(dá) AFP 然后是ALb。幼稚肝臟上皮細(xì)胞很快成熟，并進(jìn)一步分化為肝細(xì)胞或膽管上皮細(xì)胞，因?yàn)榇似诘母闻K上皮細(xì)胞其具有向這兩種肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞雙向分化的潛能，所以又稱(chēng)肝母細(xì)胞。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎肝母經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血管活性腸肽 (VIP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
軟骨糖蛋白 39(YKL-40) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble cluster of differeiation 28 (sCD28) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28(sCD28)試劑盒
Humanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit 人谷脫羧酶(GAD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Rabbit6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit兔6同前列腺素F1a
飲料L-蘋(píng)果酸比色法定量試劑盒20次
MousemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/H-2ⅠELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/H-2Ⅰ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
HRAS樣抑制因子3抗體
DPY19L2蛋白抗體
BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)
CD33重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)
CD3D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白
防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)
BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD3D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白
CD33重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠胚胎肝母細(xì)胞大鼠鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶激酶(CaMKK)試劑盒 ，英文名： CaMKK ELISA Kit
Porcine low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 豬低分子肝素(LMWH)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMCP-1/CCL2/MCAF(Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor)ELISAkit人單核細(xì)胞趨化蛋白1
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitWGA麥胚凝集素/凝集蛋白
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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