產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品型號：

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：47

更新時間：2024-11-05

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！

產(chǎn)品名稱：小鼠椎間盤纖維環(huán)細胞

組織來源：椎間盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

小鼠椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環(huán)的前側及兩側較厚，而后側較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶，后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3，其外層的細胞呈梭型，主要屬于纖維細胞，內(nèi)層細胞呈圓形，主要屬于軟骨細胞。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現(xiàn)，它們的核較圓，核仁較明顯。細胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細胞質(zhì)內(nèi)線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會減弱，椎間盤開始退變。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

土壤無機0（S-PHOS）含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

土壤總0/有機0/無機0含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

土壤脲酶（UE)測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

土壤多酚氧化酶（PPO）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

小鼠25羥基3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat fibronectin (FN) ELISA Kit 大鼠纖連蛋白(FN)試劑盒

HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit 人超敏生長激素(US-GH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanconnectivetissue-activatingpeptideⅢ,CTAPⅢ試劑盒人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CDK6/CYCD1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanproteiyrosinephosphatase,PTP/PTPaseELISAKit人蛋白酪0酸酶(PTP/PTPase/CD148)試劑盒規(guī)格：96T/48T

JM4蛋白抗體

宮頸癌原癌基因2抗體

PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標簽) Protein

C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標簽) Protein

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白

TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標簽)

C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白

PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標簽)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠椎間盤纖維環(huán)細胞大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)試劑盒 ，英文名： PF/PFP ELISA Kit

Mouse 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒

ELISA 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CF)  進口分裝

CLIAKitforLF/LTF(RabbitLactoferrin)ELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白

通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

ELISAKitMMP11基質(zhì)金屬蛋白酶11