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更新時(shí)間:2024-11-05
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產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠子宮平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源:子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠子宮平滑肌分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚,由成束或成片的平滑肌組成,肌束間以結(jié)締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能,收縮受激素的調(diào)節(jié),其收縮活動(dòng)有助于向輸卵管運(yùn)送、經(jīng)血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管,如果平滑肌層細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng),勢(shì)必造成血管壁的增厚,管腔堵塞,體外培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機(jī)制。子宮平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。子宮平滑肌細(xì)胞的主要功能:①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),在孕期能的擴(kuò)張子宮容積,保證胎兒孕育環(huán)境;②平滑肌細(xì)胞有收縮舒張能力,在生產(chǎn)時(shí)能形成生理性的縮腹環(huán),推動(dòng)胎兒向下移動(dòng),輔助生產(chǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠子宮平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ElisaKit ELISA. 96T/48T
中文名稱(chēng) 方法 規(guī)格
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
小鼠雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat Glucose depende insulinoopic polypeptide (GIP) ELISA Kit 大鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒
HumanangiostatinELISAKit 人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBeta-HydroxybyricAcid,β-OHB試劑盒人β(β-OHB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總RNA化試劑盒(低多糖/酚)20次
Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
MFSD7蛋白抗體
核苷酸焦磷酸酶2抗體
REN重組人 Renin 蛋白 Protein
細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)重組蛋白 Recombinant Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2)
CSF1重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白 Protein
FOLR2 Protein Human 重組人 FOLR2 / FBP 蛋白
HA Protein H7N7 重組甲型流感 H7N7 (A/Nlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)重組蛋白 Recombinant Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2)
FOLR2 Protein Human 重組人 FOLR2 / FBP 蛋白
REN重組人 Renin 蛋白 Protein
HA Protein H7N7 重組甲型流感 H7N7 (A/Nlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
CSF1重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白 Protein
小鼠子宮平滑肌細(xì)胞大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子13(FGF-13)試劑盒 ,英文名: FGF-13 ELISA Kit
Mouse CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) ELISA Kit 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒
ELISA 小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLepIgG(RabbitLeptospiraIgG)ELISAKit兔鉤端IgG
通用型HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitTNF-α猴腫瘤壞死因子α
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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