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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
呼吸道 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7534 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠呼吸道上皮分離自呼吸道;呼吸道是肺呼吸時(shí)氣流所經(jīng)過(guò)的通道,有肺脊椎動(dòng)物的呼吸道分上、下兩部:鼻、咽和喉合稱(chēng)上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道,合稱(chēng)為下呼吸道,或稱(chēng)為氣管樹(shù)。氣管樹(shù)是隨著動(dòng)物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的。整個(gè)呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),它能溫暖(或冷卻)、濕潤(rùn)和凈化吸入的空氣,對(duì)于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮,分布于呼吸道的內(nèi)表面,主要由柱狀,杯形,梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成??瓷先ハ駨?fù)層上皮,但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,故稱(chēng)假?gòu)?fù)層柱狀上皮,上皮表面有纖毛,杯狀細(xì)胞可分泌粘液,包裹著大量細(xì)菌,借助纖毛不斷擺動(dòng)將其慢慢移動(dòng)至出消化道。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat monocyte chemotactic protein 4 (MCP-4/CCL13) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒
HumanGasicMucin,GMELISAKit 人胃粘液素(GM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor2,3-DPG(Human2,3-Disphosphoglycerate,2)ELISAKit人2,3-二0酸甘油酸
飲料環(huán)(cyclamate)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框81抗體
周期素依賴(lài)性激酶9重組兔單克隆抗體
IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原
BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞大鼠谷酰胺(Gln)試劑盒 ,英文名: Gln ELISA Kit
Porcine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒
出血性大腸桿菌(EHEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMIP-1Alpha/CCL3(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Alpha)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白1α
體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性試劑盒20次
ELISAKit2,3-DPG犬2,3-二0酸甘油酸
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