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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠骺軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠骺軟骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：高度保守基因相關(guān)蛋白Membralin抗體 晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞 大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 COR-L23/R人肺大細(xì)胞癌 NCI-H23人肺癌細(xì)胞
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：41
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠骺軟骨細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
生長板組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7531 |
細(xì)胞簡介：
小鼠骺軟骨分離自骨骺生長板；骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織，其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大，最終被骨組織所替換，對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些骺軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骺軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬載脂蛋白B（Apo-B）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬孕（PROG）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬孕激素（P）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒
Human myosin (Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白(Myosin)試劑盒
Rabbitprothrombinfragme1+2,F1+2ELISAKit 兔原片段F1+2(F1+2)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAi-TM甲狀腺微粒體抗體(TM抗體)
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性熒光定量試劑盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒
5-三磷酸肌醇受體1抗體
周期素D2抗體
IL1R2重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)
ANP32A重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
BLOC1S2 Protein Human 重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
PGLYRP1 Protein Mouse 重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)
BLOC1S2 Protein Human 重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL1R2重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PGLYRP1 Protein Mouse 重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ANP32A重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠骺軟骨細(xì)胞大鼠谷酰胺合成酶(GLUL)試劑盒 ，英文名： GLUL ELISA Kit
Rabbit ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒
大腸桿菌(O157:H7)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIP-1Beta/CCL4(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Beta)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白1β
體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKit5-HT犬5羥色胺
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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